1. 研究目的与意义
内容:按照GB 5009.82-2016中第四法高效液相色谱法对样品维生素D3软胶囊进行测定,研究该检测方法对本产品的适用性,对试验过程中相应的参数设定试验,对试验过程中的样品前处理过程包括样品称样量、正相制备参考条件及反相测定参考条件的选择及方法的精密度、重复性、回收率等方面进行研究。
意义:研究国家标准 GB 5009.82-2016《食品安全国家标准 食品中维生素A、D、E的测定》中第四法高效液相色谱法对样品中维生素D3检测适用性,并根据样品特性作适当的方法补充以确保方法对维生素D3含量检测的准确性。
2. 文献综述
维生素D3测定文献综述摘要:目前有很多关于维生素D3含量的测定方法,本文介绍了高效液相色谱-串联质谱法、荧光法、反相高效液相色谱法,举例介绍其操作过程,并从多方面综合分析它们的优缺点,总结得出它们的适用范围,以确定最适合测定维生素D3含量的方法。
关键词:维生素D3测定、测定原理、测定方法引言:维生素D3是一种脂溶性维生素,性质不稳定,遇光和空气均容易变质、降解,其是代谢率最高的一种维生素D形式,不仅可以通过人体自身合成,还可以通过食用动物性食物获得,比如在一些海产类的鱼干中提炼的鱼肝油。
维生素D3不仅可以提高人体对于钙、磷的吸收,促进血浆中的钙、磷水平饱和,还可以降低乳腺癌、肺癌、结肠癌等常见癌症的发病率;此外还可以调节胎盘的发育和功能,若孕妇的维生素D3水平维持得较好,可预防流产。
3. 设计方案和技术路线
标准品:称样(维生素d2、d3) 分别配制成标准储备液、标准中间使用液、标准使用液混标经过正相高效液相半制备,记下保留时间。
样品:试样制备和处理→皂化→提取→净化→浓缩→正相半制备→反相分离标曲:维生素D3标准中间使用液加维生素D2内标液配制成不同浓度的溶液,以维生素D3和维生素D2 峰面积比值对浓度作图,绘制标准曲线。
以样品取样量、色谱柱种类、内标液浓度为变量,分别设置平行实验,对样品中维生素D3检测适用性进行研究。
4. 工作计划
已完成文献参考、制定试验方法,将进行系统适应性试验和方法学验证
5. 难点与创新点
本实验对于维生素D3的测定,采用 HPLC 技术,提供了一个简单、快速、实用的样品制备及检测的方法。
维生素D3是一种脂溶性维生素,其含量较低,且性质不稳定,遇光和空气均易变质降解,而且其它杂质对其稳定性和检测都有影响和干扰,采用半制备正相高效液相色谱可获得样品中的纯化组分。
采用反相液相色谱,方法简便、快捷、准确度高。
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