1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
禽流感是由禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)引起的禽类的一种传染病。
目前，根据表面糖蛋白血凝素（HA）基因和神经氨酸酶（NA）基因，AIV可以分为16种HA亚型和9种NA亚型。
H9N2亚型禽流感病毒能导致禽类产蛋下降、免疫抑制病，或与其它病原体混合感染时导致高死亡率，给我国养殖业造成了巨大的经济损失。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标：获得含有上海地区H9N2流行毒株的HA和NA基因的病毒样颗粒，为其它亚型流感病毒颗粒疫苗的快速制备奠定基础，应用于日后流感病毒流行的基因型能够迅速更换相配的疫苗。
研究内容：1.杆状病毒载体pFastBacDual-HA-NA的构建及鉴定。
2.重组杆状病毒的拯救。
3. 研究的方法与方案
研究方法：1.载体的构建与转化2.细菌的培养与鉴定3.病毒的转染与体外细胞培养4.PCR扩增与鉴定技术5.光学显微镜与电子显微镜的观察技术路线：pFastBacDual-HA-NA的构建及鉴定重组杆状病毒的拯救病毒样颗粒形态观察实验方案：将HA基因（XhoI和KpnI）酶切连接于pFastBacDual载体，转化大肠杆菌DH5α，挑取白色菌落，提取质粒，鉴定并测序验证，获得重组质粒pFastBacDual-HA；按照同样的方法，将NA基因（BamHI和EcoRI）连接于重组质粒pFastBacDual-HA，获得重组质粒pFastBacDual-HA-NA，鉴定并测序验证。
根据Invitrogen公司的Bac-to-Bac杆状病毒表达系统说明书，将重组转移载体pFastBacDual-HA-NA转化大肠杆菌DH10Bac，提取质粒并鉴定，获得阳性重组杆粒rBacmid-HA-NA。
用rBacmid-HA-NA转染Sf9昆虫细胞，在27℃培养，观察细胞病变，当细胞病变明显时，收集细胞上清，获得重组杆状病毒。
4. 研究创新点
1.通过本研究可以摸清近年来上海地区H9N2病毒的优势基因型和抗原群，筛选出抗原性较好并为主要流行株，为下一步制备H9N2病毒样颗粒奠定基础。
2.本课题是国内首次开展的H9N2亚型AIV VLPs疫苗研制，研究的是流感病毒VLPs疫苗，缺失遗传物质，无法进行复制，因而疫苗具有极好的安全性。
同时研制的AIV VLPs疫苗，可诱导产生黏膜免疫，快速应对流感病毒易变异的特性，克服了传统灭活疫苗在此方面的重大功能缺失。
5. 研究计划与进展
2016年9月上旬: 回顾相关专业知识，查阅相关文献，为研究打下基础。
2016年9月中旬 至 2016年11月上旬：构建表达载体。
2016年11月中旬 至 2016年12月上旬：重组杆状病毒的拯救，进行中期汇报。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
