1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)可以导致猪肺疫、牛羊败血症、禽霍乱等危害严重的畜禽传染病[1]。其中产毒素性多杀性巴氏杆菌(toxigenicPasteurella multocida,T Pm)是引起猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis,PAR)的主要病原菌。该菌分泌一种约146kD的皮肤坏死毒素（Pasteurella multocidatoxin,PMT），由toxA基因编码，可直接引起猪鼻炎，鼻梁变形，鼻甲骨萎缩甚至消失，全身代谢障碍，生产性能下降，同时可诱发其他病原微生物感染，甚至导致死亡[2-4]。PAR是世界公认的危害集约化养猪生产的重要疾病之一，并被国际兽疫局（OIE）定为B类动物传染病[5]。
PAR于1830年首先发现于德国，现已分布于世界养猪业发达的各个国家和地区。1964年，我国首次从英国进口约克种猪发现该病，到目前为止全国很多地方都有不同程度的发生和流行。每年因PAR导致养殖户1700万元的经济损失[6]。该病可推迟肉猪市时间，并且可使感染猪机体抵抗力下降，易感诸如支原体、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病原，增加死亡率。因此，控制该病对于提高猪群的生产性能至关重要[7]。这就需要借助实验室诊断技术进行确诊。目前，PAR的诊断方法有多种，其发展趋向于敏感，准确，简单和廉价。
目前常见的产毒素性多杀性巴氏杆菌血清学检测方法有琼脂扩散试验、间接血凝试验以及酶联免疫吸附试验（ELISA）等。由于琼脂扩散实验和间接血凝实验以其较低的敏感性或繁琐的操作决定了这两种方法不适合对大批量血清样品进行快速检测。而大量试验证实间接ELISA方法具有很高的灵敏性[8,9]。此外ELISA还有着特异、快速、准确等特点[10,11]，特别是近年来酶标仪的系统化使用使间接ELISA的使用更加普遍。
2. 研究的基本内容和问题
1.1 研究目标
提取纯化PMT，建立优化产毒素性多杀性巴氏杆菌感染抗体间接ELISA方法。
1.2 研究内容
3. 研究的方法与方案
1 研究方法
查阅文献，实验分析。
2 技术路线
4. 研究创新点
目前国内尚无商品化针对PMT毒素抗体的ELISA试剂盒。
5. 研究计划与进展
2016年9月：查阅文献，学习掌握间接ELISA操作，收集临床血清样本。
2016年10月：提取纯化PMT蛋白，筛选标准阴阳性血清。
2016年11月：建立优化产毒素性多杀性巴氏杆菌感染抗体间接ELISA方法。
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