1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义：
猪圆环病毒病主要是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2）引起的猪的多种疾病的总称，可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾病综合征等。随着规模化养殖业的不断发展，由PCV2引起的疫病呈上升趋势，给全世界养猪业带来了巨大的经济损失。PCV2分为PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e多个基因型和亚型，根据近些年以来的流行病学调查研究，其中PCV2d、PCV2b为当前流行的主要基因型[1]。因此，研究新型PCV2d疫苗具有广阔的应用前景，这也将有助于防控猪圆环病毒的流行。本研究运用细胞传代培养技术，获得在PK15细胞中能适应并稳定传代的PCV2d毒株，为PCV2的基因分型及其变异情况提供了参考资料, 也为该病的分子流行病学调查及筛选疫苗候选毒株提供了理论依据。
国内外研究进展：
2. 研究的基本内容和问题
目标：获得可在体外稳定传代的PCV2d毒株
内容：本实验将PCV2毒株接种 PK15细胞，连续盲传几代后收取细胞病毒液，提取DNA，经PCR检测、全基因组序列测定、荧光定量PCR检测病毒含量，以期获得可在体外稳定传代的PCV2d毒株。
拟解决的关键问题：
3. 研究的方法与方案
研究方法：
本研究所涉及到的研究方法有以下：PK15细胞的传代培养、病料处理、病毒接种、病毒培养、病毒DNA的提取、普通PCR、荧光定量PCR、PCV2病毒全基因组序列测定及分析等技术方法。
技术路线：
4. 研究创新点
1.本次分离鉴定的是PCV2d毒株，正是近几年中国流行的PCV基因亚型，若获得稳定繁殖下去的PCV2d毒株，这将为PCV2d流行毒株疫苗的研发奠定基础。
2.本研究的目的是想获得能够在PK15细胞上稳定传代，且病毒滴度较高的PCV2毒株，这对研制PCV2疫苗有着重要的意义。
5. 研究计划与进展
第一阶段：2018年9、10月份
（1）查找猪圆环病毒相关文献，对其有大概认知。重点阅读PCV2分离和鉴定部分，熟知实验原理、实验目的、实验方法、实验创新点等。
（2）熟悉实验室的规章制度和毕业实习纪律，尤其是细胞间的操作规范。了解实验器材和耗材的摆放位置和操作规程。
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