TonB能量系统对嗜水气单胞菌NJ-35耐药性的影响开题报告

 2023-02-17 01:45:15

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

嗜水气单胞菌是一种典型的原发性条件致病菌，能够感染不同物种，鱼类尤其易被该病原菌感染，目前防止嗜水气单胞菌引发的病害主要还是依靠抗生素。大量抗生素的使用使该菌的耐药性急剧升高，导致该菌引发的鱼类疾病更加难以控制，严重制约了水产养殖业的健康发展。

在前期实验中，发现缺失TonB系统后，细菌对大环内脂类抗生素药物敏感性发生明显变化。TonB系统参与能量依赖性受体介导Fe3 、维生素B12、碳水化合物等营养物质跨外膜蛋白运输[1, 2]。有文献报道TonB系统不仅参与营养物质的吸收，而且也会影响细菌的药物外排[3]。在恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）中发现exbD基因的缺失导致细菌对环丙沙星、头孢噻肟、亚胺培南等抗生素的敏感性增强[4]。在铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）中，tonB基因的缺失会导致细菌对诺氟沙星、环丙沙星、红霉素、四环素等抗生素的敏感性增强[5]。Zhao等[5]研究发现tonB的缺失导致铜绿假单胞菌耐药性的降低可能与MexA-MexB-OprM外排泵的活性降低有关。在淋球菌（Neisseria gonorrhoeae）中，MtrC-MtrD-MtrE外排泵功能的发挥同样需要TonB系统的参与[6]。

本课题初步探究了TonB系统对嗜水气单胞菌耐药性影响的作用机制，对进一步探究嗜水气单胞菌的耐药机制具有重要意义。

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2. 研究的基本内容和问题

  1. TonB系统对细菌药物敏感性的影响。

  2. TonB系统对细菌外排作用的影响。

3. 研究的方法与方案

  1. 采用肉汤稀释法测定TonB系统缺失株对各类抗菌药物的MIC

  2. 测定在外排泵抑制剂的存在下，TonB缺失株对各类抗生素的MIC

  3. 在野生株和TonB缺失株的基础上，建立相应外排泵缺失株

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    4. 研究创新点

    在调查TonB系统缺失对嗜水气单胞菌药物敏感性影响的基础上，从影响细菌外排泵功能的角度探究其可能的机制，为揭示嗜水气单胞菌耐药机制提供新思路。

    5. 研究计划与进展

    1. 9月1日-9月30日，测定TonB系统缺失株对各类抗菌药物的MIC。

    2. 10月8日-10月30日，测定在外排泵抑制剂存在的基础上，TonB缺失株对各类抗生素的MIC。

    3. 11月1日-11月30日，在野生株和TonB缺失株的基础上，建立相应外排泵缺失株

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