1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
裂谷热(Rift Valley fever,RVF)是一种由裂谷热病毒(Rift Valley fever virus,RVFV)引起，节肢动物传播的热性、急性人畜共患病，主要流行于非洲反刍动物，经蚊传播，多发于蚊虫活动季节[1]。对动物和人类健康构成严重威胁，在RVF感染区，RVF的流行对家畜造成重大损失，病毒感染人后，临床表现为脑炎、视网膜炎等症状，个别有出血热症状，人类摄入未经高温消毒或未煮过的牛奶也存在感染该疾病的可能性[2][3]；本病对绵羊、山羊以及牛的危害都比较严重，可引起怀孕母畜流产和新生仔畜的大面积死亡，大龄非怀孕动物也较易感，但临床抗病性较强[4][5]。本病的病变特征为肝损伤；流行特征为众多动物流产，新生仔畜大量死亡，甚至引起人群发病，流行常伴随着特大降雨的周期循环，较少发生在半干旱地区[4]。
目前，对裂谷热病毒的诊断方法有临床和实验室检测方法，根据流行病学和特征性临床症状可做出初步诊断，但引起家畜出现流产症状的还有弯曲菌、牛传染性鼻气管炎、蓝舌病、布氏杆菌等，需鉴别[6]。RVFV的实验室诊断需要在专业的实验室进行（三级以上）。常用的分子学方法如RT-PCR、实时荧光RT-PCR都已经建立和应用，另外，RT-LAMP方法特异性和敏感性方面不亚于荧光RT-PCR方法，在快速检测方面起到一定的作用。但PCR方法，只能检测病毒感染后一周内的RVFV[7][8]。血清学方面主要是ELISA方法，如检测IgM和IgG抗体的试剂盒。试验效果证明商品化ELISA检测RVFV抗体技术已用于临床诊断、风险评估和风险因子的研究[2]。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标：
建立裂谷热病毒NS蛋白的阻断ELISA抗体检测方法，并进行条件优化，为其临床检测及鉴别诊断提供有效的工具。
2.研究内容：
3. 研究的方法与方案
1.研究方法及实验方案
（1）重组蛋白的纯化和蛋白浓度的检测
将菌液接种于含有KNA的LB液体培养基，菌液37℃培养至OD600为0.6时，用0.5mLIPTG(200m/M)诱导5h后，收取样品做SDS-PAGE电泳分析鉴定。
4. 研究创新点
NS作为RVFV的非结构蛋白，可以诱导机体产生特异抗体。先前的ELISA检测主要针对病毒的结构蛋白N，无法区分野毒感染抗体与灭活疫苗免疫抗体。本研究选择NS作为靶抗原，制备单抗，建立阻断ELISA方法，具有很强的特异性，且可用于临床鉴别诊断，具有较好的应用前景与价值。
5. 研究计划与进展
2018.8-2018.9：查找阅读相关文献，学习并熟练掌握蛋白纯化以及阻断ELISA的操作技术；
2018.9：NS蛋白的表达、纯化以及浓度的检测；
2018.10.1-2018.10.15：抗原包被浓度和酶标抗体工作浓度的确定；
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