1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
猪瘟（ＣＳＦ）是由猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）引起的一种高致死性、烈性传染病［1］，稽留高热、出血、母猪流产为主要特征。该病主要通过呼吸道和消化道传染，播速度快，病率和死亡率都很高，全球养猪业带来巨大的经济损失［2，3］。近年来中国ＣＳＦ发病呈非典型、温和型增加态势，凭借临床症状和病理变化诊断该病存在一定的困难。为建立一种能够应用于临床样本猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）检测的快速、简便且标准化程度高的检测技术，满足畜牧业生产和成功开展猪场净化的需求，研究建立的ＲＴ－ＰＣＲ方法具有敏感性、特异性强、重复性好的特点，对养猪业的发展与猪厂净化具有十分重要的意义。
［1］ＶａｎＯｉｒｓｃｂｏｔＪＴ．Ｖａｃｃｉｎｏｌｏｇｙｏｆｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅｒ：ｆｒｏｍｌａｂｔｏｆｉｅｌｄ［Ｊ］．ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，2003，6：367－384．
［2］ＤａｖｉｄＳｓＥｄｒｉＮ，ＹａｋｏｂｏｓｏｎＢＡ，ｔａｌ．ＥｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅｒｉｎＩｓｒａｅｌｉｎ2009［Ｊ］．ＶｅｔＪ，2011，90（2）：146－149．
2. 研究的基本内容和问题
本研究的目标和内容是建立猪瘟病毒实时荧光定量PCR方法为临床上猪瘟病毒的诊断和定量研究，提供重要的检测工具。
拟解决的关键问题是对荧光定量PCR反应条件的优化及其特异性、敏感性和重复性检测。
3. 研究的方法与方案
荧光定量PCR将常规PCR与荧光检测技术相结合，应用于临床上高通量病原体的检测。本研究以CSFV NS5B基因的保守区域为靶序列,设计并合成了一套特异性的引物，希望建立了一种针对CSFV NS5B蛋白的实时荧光定量PCR。
技术路线与方案：1.核酸抽提 2.设计引物 3.标准品的制备 4.荧光定量PCR反应条件的优化及其特异性、敏感性和重复性检测5.临床样品检测
4. 研究创新点
目前，对于CSFV的检测主要利用免疫荧光、ELISA等，但是这些方法分别存在费时、费力，异性敏感性低，易出现污染，以判断结果等缺点，用存在一定的局限性。
荧光定量PCR方法因其具有快速高效、特异灵敏、通量高等优点，直备受关注。
本研究选择CSFV的NS5B基因保守区序列来设计引物，建立一种可定量检测CSFV检测方法.
5. 研究计划与进展
1.针对CSFV NS5B进行引物设计，2.病毒核酸的提取
3.CSFV NS5B目的基因的扩增
4. CSFV胶回收产物与pMD19-T载体的连接
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