1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.本项目研究意义
目前,狂犬病毒的致病机制尚未明确,并且关于狂犬病毒感染后宿主细胞 circRNA 表达谱的研究也尚无报道,他们之间存在何种联系值得探究。本项目旨在探究circRNA在狂犬病毒感染过程中的作用及其作用机制,为狂犬病毒感染机制研究找到新的突破口。随着 circRNA 芯片和 RNA 测序等技术的出现与发展,我们期望通过 circRNA 芯片技术鉴定狂犬病毒感染人神经细胞后 circRNA 的差异表达谱,并进行筛选。
2.环状RNA国内外研究现状
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2. 研究的基本内容和问题
1.实践目标与内容
利用芯片技术获得RABV感染后细胞中差异表达的circRNA,通过RT-qPCR等方法验证差异circRNA的存在与特异性表达;检测circRNA表达差异、组织分布、不同阶段表达特性情况。
2 .拟解决的关键问题
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3. 研究的方法与方案
1.研究方法
细胞培养与病毒繁殖———病毒滴度测定———细胞感染实验———提取RNA——高通量测序——生物信息学分析——RT-qPCR验证差异表达circRNA
2.可行性分析
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4. 研究创新点
近年来,针对宿主ncRNA与病毒相互作用的相关研究已有众多文献报道,在RABV研究领域,已有关于小鼠感染RABV后脑组织mRNA、miRNA以及lcRNA表达谱的研究,但关于RABV感染后宿主细胞circRNA表达谱的研究仍无相关报道。
5. 研究计划与进展
1.研究计划
1.1 circRNA表达谱的验证和分析及功能性circRNA的筛选、鉴定和分析。
1.2 circRNA功能、特性及机制研究。
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