1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1. 本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）乳腺炎是奶牛经常发生的疾病，其不仅引起奶产量下降，而且严重影响乳的品质，甚至危害到人类的健康，据统计乳腺炎是奶牛养殖行业中造成经济损失最大的疾病之一。
乳腺炎根据其临床病症分为临床型乳房炎和隐性型乳房炎，临床型乳腺炎以乳房红肿热痛、乳腺组织损伤为主要特征，而隐性乳腺炎无可见临床症状。
奶牛罹患乳腺炎后，引起乳腺上皮细胞合成和分泌功能不同程度障碍，乳脂肪、乳蛋白和乳糖等主要乳成分合成量明显减少，造成牛奶品质显著下降[1-3]。
2. 研究的基本内容和问题
2.研究的目标、内容和拟解决的关键问题2.1 研究目标：1) 培养较高纯度奶牛乳腺上皮细胞；2) 探究LPS对奶牛乳腺上皮细胞分泌功能的影响；2.2研究内容：1) 奶牛乳腺上皮细胞的纯化、培养及鉴定；2) LPS处理奶牛乳腺上皮细胞后蛋白表达差异分析；2.3拟解决的关键问题1) 奶牛乳腺上皮细胞的培养；2) LPS对上皮细胞分泌功能的影响；3. 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析3.1 拟采取的研究方法1) 奶牛乳腺上皮细胞的纯化、培养及鉴定：外科手术法釆取乳腺组织，进行原代培养，经3至4次纯化后，可得到纯度较高(大于95%)的奶牛乳腺上皮细胞。
上皮细胞经免疫组化鉴定后，可以用于后续试验。
2) 乳腺上皮细胞蛋白表达检测：通过iTRAQ法，测定差异表达蛋白，并对差异表达蛋白进行后续验证。
3. 研究的方法与方案
3. 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析3.1 拟采取的研究方法1) 奶牛乳腺上皮细胞的纯化、培养及鉴定：外科手术法釆取乳腺组织，进行原代培养，经3至4次纯化后，可得到纯度较高(大于95%)的奶牛乳腺上皮细胞。
上皮细胞经免疫组化鉴定后，可以用于后续试验。
2) 乳腺上皮细胞蛋白表达检测：通过iTRAQ法，测定差异表达蛋白，并对差异表达蛋白进行后续验证。
4. 研究创新点
4.本项目的创新之处探究LPS对乳腺上皮细胞分泌功能的影响。
5. 研究计划与进展
5.项目研究计划及预期进展1）2016年11月-2017年1月：乳腺上皮细胞培养以及实验室指标测定阶段。
2）2017年3月-2016年5月：整理数据，撰写论文。
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