载锌凹凸棒石黏土对大肠杆菌K88的抑菌效果研究开题报告

 2023-02-14 01:45:33

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

现代规模化的养猪生产中,多采用仔猪早期断奶技术,断奶时仔猪消化系统发育不完善,肠道微生物非正常增殖会导致其肠道功能受损、腹泻,造成生产性能下降。

目前养殖业主要依赖疫苗和药物防治疾病,但疫苗并不能完全保护动物不受感染;使用抗生素不仅抑制和杀灭有害菌,也会对有益菌群产生抑制、杀灭等作用,造成耐药病原菌产生、抗生素效力下降、猪肉抗生素残留和微生物抗药性等。

随着社会进步和人民物质生活水平的提高,高品质、绿色、无残留的动物产品将是消费者的首选。

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2. 研究的基本内容和问题

2.研究的目标、内容和拟解决的关键问题2.1研究目标通过体外试验比较颗粒大小不同的凹凸棒石对大肠杆菌K88的抑菌性能研究,找出最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,为载锌凹土在饲料中的合理应用和抗生素替代品研究提供一定的理论依据。

2.2研究内容1、比较不同粒径凹土载锌能力的差别以及载锌条件对载锌量的影响。

2、通过试验确定凹凸棒石对大肠杆菌K88的最小抑菌浓度(MIC)3、通过试验确定凹土棒石对大肠杆菌K88的最小杀菌浓度(MBC)4、比较不同时间凹凸棒石对大肠杆菌K88的杀菌率变化,绘制杀菌率曲线。

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3. 研究的方法与方案

3.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析3.1 研究方法试验通过将培养到对数期的大肠杆菌K88点板到含有载锌凹土的固体培养基中进行培养,培养24h,观察菌落扩增程度确定其最小抑菌浓度;将大肠杆菌K88培养到含有凹土的液体培养基中,培养一定时间后进行稀释涂板,培养24h后数菌落数,计算杀菌率,确定最小杀菌浓度;通过计算最低抑菌浓度和最小杀菌浓度等方法寻找最佳作用条件,对大肠杆菌K88进行培养,不同时间进行涂板,计算杀菌率,分析数据,绘制不同时间杀菌率曲线,来研究甜菜碱对大肠杆菌K88抑菌作用机理。

3.2 实验方案3.2.1确定最小抑菌浓度(MIC)用接菌环接一环置于甘油中冷冻保存的大肠杆菌于含5mL液体LB培养基的试管中,用灭菌胶塞将管口封闭并用牛皮纸包裹管口,于37℃恒温摇床160r/min活化10-12h,取一定量菌浊液以1%接种量接种于含LB培养基的灭菌试管中封闭,于37℃恒温摇床160r/min,3h进入对数生长期,备用。

分别称取一定量的载锌凹土加入20mL加热溶解完全的麦康凯培养基于50mL锥形瓶中混合,与121℃高压灭菌20min,将经高压灭菌的麦康凯培养基及含凹土培养基取出,冷却至50℃-60℃后,混合均匀倒入灭菌培养皿中,制成一系列浓度的含载锌凹土的培养基,待培养基固定后将平板倒置,备用,每个浓度三个重复。

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4. 研究创新点

本实验以粒径不同凹凸棒石载锌凹土对大肠杆菌K88的抑菌作用,通过观察及计算,分别得出不同载锌凹土的最低抑菌浓度、最小杀菌浓度和不同时间抑菌率,并且测定细菌生长代谢相关指标,通过以上数据比较分析粉碎粒度与载锌量对大肠杆菌K88的抑菌效果的影响,以此来研究载锌凹土对大肠杆菌K88的抑菌机理,从而为载锌凹土在饲料中的合理应用及抗生素替代品研发提供一定的试验依据。

5. 研究计划与进展

2016年10月2016年12月查阅文献,拟定实验计划,准备试验材料,进行预实验。

2017年1月2017年4月 进行抑菌试验,计算抑菌率,绘制抑菌率曲线图。

2017年4月2017年5月数据分析,整理实验数据,撰写毕业论文。

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