1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1. 本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)肥胖是指体内脂肪细胞数目增多或体积增大,脂肪主要是甘油三酷堆积过多,使体重超过标准体重的以上的病理状态[1]。
脂肪是生命运转的必需品,其在多种疾病的发病机制的信号传导中起一定作用。
脂肪里的脂肪酸对我们的大脑、免疫系统乃至生殖系统的正常运作来说十分重要,生殖轴(下丘脑、垂体和性腺)表现出一定营养传感的机制,并与营养状况和生育相关[2]。
2. 研究的基本内容和问题
2.研究的目标、内容和拟解决的关键问题2.1 研究目标:肥胖可能通过能量代谢相关信号通路调控卵泡发育及凋亡过程,为了探讨肥胖对小鼠卵泡发育的作用机制,我们计划以ICR小鼠为模型,用免疫组织化学方法和western blot检测相关通路蛋白的表达及定位变化;HE染色和TUNEL 化学染色观察小鼠卵巢中卵母细胞巢裂解及原始卵泡库生成状况;进而分析分析肥胖与卵泡发育的关系,从而探索脂肪对小鼠卵巢卵泡的影响。
2.2研究内容:① 选择3-4周小鼠60只,随机平均分为6组,每组10只。
② 第一组小鼠为对照组,饲喂普通日粮,其余各组为实验组,均饲喂高脂日粮。
3. 研究的方法与方案
3.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析3.1 拟采取的研究方法试验I、结合ICR小鼠卵巢卵泡发育研究梅山猪卵泡发育的组织学特征首先建立肥胖小鼠模型,研究肥胖对卵泡发育的影响和机制有十分积极的意义。
本课题拟应用HE染色、TUNEL凋亡检测等方法结合ICR小鼠卵巢卵泡发育特征研究小鼠卵泡发育特征,对各级卵泡的发育进行观察和统计,并对相关数据进行统计分析。
试验II、肥胖对ICR小鼠卵泡发育和闭锁过程中PARP-1及其相关信号通路的影响收集ICR小鼠试验组和对照组ICR小鼠卵巢,对PARP-1相关信号通路蛋白进行免疫组织化学(IHC)定位和western blotting技术进行蛋白表达的定量分析。
4. 研究创新点
4.特色或创新之处结合ICR小鼠模型研究肥胖对卵泡发育及闭锁过程)的影响及机制,这提高了本课题科学性,研究结果更具参考价值。
首次研究PARP-1对肥胖小鼠模型卵泡凋亡和卵泡发育的影响,并探究其相关信号通路对卵泡发育的调控作用;这方面未见报道。
5. 研究计划与进展
5.项目研究计划及预期进展2016年试验计划:结合ICR小鼠模型从组织学研究肥胖模型小鼠卵泡发育特征。
2017试验计划:通过免疫组织化学(IHC)、Western blot和TUNEL 等方法研究PARP-1相关信号通路蛋白如PARP-1、cleavaged-PARP-1、caspase3、等的表达定位及其相关信号通路对卵泡发育及闭锁的调控机制。
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