1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1 本课题意义野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L．的干燥头状花序，秋、冬二季花初开时采摘、晒干，或蒸后晒干；其性微寒，味苦、辛，归肝、心经，功能清热解毒、泻火平肝，主治疔疮痈肿、目赤肿痛、头痛眩晕。
野菊花中主要活性成分为黄酮类化合物，其中蒙花苷是《中国药典》（2015年版）中规定的指标成分，其含量不得少于0.80%（中国药典，2015）。
人为活动的加剧导致环境中的重金属不断增加，农作物和中药材污染问题日渐暴露（郭巧生等，2009；韩小丽等，2008；刘兰英等，2016；李堆淑等，2016）。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标：通过研究野菊对Pb、Cd胁迫的耐性机制、富集转移特性及重金属对野菊花化学品质的影响规律，为野菊规范化种植及资源开发利用提供理论依据。
2 研究内容： 2.1 采用常规生理生化实验方法，初步探究野菊对Pb-Cd复合胁迫的耐性机制； 2.2 采用HPLC测定野菊花中化学成分含量，探究重金属胁迫对野菊花化学品质的影响； 2.3 Tessier五步提取法揭示水分条件对土壤中重金属有效形态的影响； 2.4 微波消解/电热板消解-ICP-MS测定野菊各部分/土壤重金属总量，分析重金属在野菊植株中分布规律及富集转移特性。
3 拟解决的关键问题： 3.1 野菊重金属耐性机制响应指标的测定 3.2 野菊花化学成分含量的测定 3.3 土壤重金属形态含量的测定
3. 研究的方法与方案
1 研究方法： 1.1野菊重金属耐性机制叶绿素含量测定：95%乙醇提取，分光光度法；可溶性糖含量测定：蒽酮比色法；可溶性蛋白含量测定：考马斯亮蓝G-250 染色法；丙二醛（MDA）含量测定：硫代巴比妥酸加热比色法；超氧化物歧化酶（SOD）活性测定：硝基四氮唑蓝（NBT）还原法；过氧化物酶（POD）活性测定：愈创木酚法；野菊各部位鲜样有机酸含量测定：HPLC法；非蛋白巯基（NPT）含量的测定：参照Rama等的方法； GSH含量的测定：参照Hissin等的方法； PCs含量的计算：PCs的含量等于非蛋白巯基含量(NPT)与GSH含量的差值； 1.2 野菊重金属吸收富集特性野菊各部位Pb、Cd及土壤中总量测定：微波消解/电热板消解-ICP-MS测定法；土壤中不同赋存形态Pb、Cd含量测定：Tessier 提取法； 1.3 重金属胁迫对野菊花化学品质的影响野菊花中蒙花苷含量的测定：参照《中国药典》（2015年版）中的测定方法；野菊花中刺槐素、木犀草素、芹菜素、槲皮素含量测定：参照申海进的方法。
2 技术路线： 3 实验方案： 采用温室盆栽实验，对五月份恢复生长的野菊植株移栽苗进行PbCd及水分复合胁迫，PbCl2施加量分别为0、200、400、600 ㎎Kg-1四个水平，记为Pb0、Pb200、Pb400、Pb600；CdCl2施加量分别为0、25、50、100 ㎎Kg-1四个水平，记为Cd0、Cd200、Cd400、Cd600；每次灌水量分别为500、750、1000、1250 mL/盆四个水平，记为H500、H750、H1000、H1250。
三因素四水平进行正交试验组合，共16个处理，每个处理9个重复，每盆1株。
4. 研究创新点
目前在野菊花的研究主要集中在化学成分和药理上，生理研究不多，尤其在铅镉复合胁迫对其生理生化指标以及化学成分含量的影响方面几乎没有研究，而复合胁迫中的水分控制可能能够通过影响土壤中重金属形态从而影响野菊植株对铅镉元素的吸收。
本研究将揭示野菊对铅镉交互作用及水分胁迫的抗性机制、吸收特性，为野菊规范化种植和药材质量控制提供理论依据。
5. 研究计划与进展
本实验预计在2018年5月完成。
（1）2017.02-2017.03 查阅课题相关文献，确定实验方法；（2）2017.04-2017.05 野菊花实生苗移栽；（3）2017.06-2017.10 完成Pb-Cd复合迫条件下对野菊几项生理生化指标的测定；（4）2017.11-2017.12 野菊植株收获，按部位保存鲜样，并测定各部分干样及土壤中重金属总量；（5） 2018.01-2018.02 测定野菊花中化学成分含量；（6） 2018.03-2018.04 测定野菊各部分鲜样中有机酸、NPT、GSH、PCs含量及土壤中重金属形态；（7） 2018.04-2018.05 处理实验数据；（8） 2018.05-2018.06 撰写毕业论文，准备毕业答辩。
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