归芍方对斑马鱼眼部凋亡细胞的作用开题报告

 2022-12-26 15:12:42

1. 研究目的与意义

近年来,随着工业生产和塑料制品的使用,塑料垃圾的大量增加。被列入中国环境优先污染物黑名单的邻苯二甲酸二丁酯(DBP),广泛应用于工业生产和塑料制品中,普遍存在于环境中,它在人与动物体内起着类似雌性激素的作用,可导致内分泌紊乱、生殖机能失常掣,对人和动物都有致畸、致癌和致突变的作用,并具有较强的内分泌干扰性,已经受到了越来越多的关注。目前,大量的研究都是使用鼠类模型来研究DBP的三致效应,生殖毒性和发育毒性等。

斑马鱼是生命科学研究中重要的模式脊椎动物之一,具有尺寸较小,易于饲养,容易繁殖,单次产卵量高的优点。斑马鱼的表型畸形主要包括心包积液,心脏畸形,眼部畸形或眼睛缺失,脊柱弯曲等形态畸形。由于斑马鱼卵大、体外发育及发育速度快,且在早期阶段胚胎完全透明,这使得斑马鱼成为观察胚胎发育过程中器官形态发生变化的最佳模型动物。

归芍方出自汉代张仲景《金匮要略》,临床常用方剂,由当归、芍药、白术、川芎、泽泻、茯苓六味中药组成。主治妇人肝虚气郁,脾虚血少,肝脾不和之证,重用芍药以敛肝止痛,白术、茯苓健脾益气,合泽泻淡渗利湿,佐当归、川芎调肝养血。随着研究的深入,从最初的安胎作用目前已广泛地应用在治疗女性妊娠期贫血、卵巢功能不全及更年期综合征等妇科疾病。有研究表明,当归芍药散可显著调节免疫紊乱并提高免疫复合物的清除率。

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2. 文献综述

DBP诱导斑马鱼凋亡模型的建立及评价

殷格漫

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3. 设计方案和技术路线

方案:

1.斑马鱼的培育繁殖:定期换液,产卵。

2.构建凋亡模型:用10μM DBP诱导斑马鱼胚胎,再利用MTT法测定,选择最佳给药浓度与给药剂量。

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4. 工作计划

1.第一阶段(2022.1):查阅文献,培育斑马鱼。

2.第二阶段(2022.2):建立合适的斑马鱼凋亡模型。

3.第三阶段(2022.2~2022.3):实验预试,确定给药浓度与给药剂量。

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5. 难点与创新点

1.利用斑马鱼凋亡模型来研究DBP的三致效应,造模时间短、成本低,且在早期阶段胚胎完全透明,利于观察胚胎发育过程中器官形态发生变化。

2. 从临床有效的药物入手讨论药物对细胞凋亡的作用,针对性、可操作性强。

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