1. 研究目的与意义
随着老龄化的加剧，脑血管疾病的发生率逐年上升，其中缺血性脑卒中最为常见。
当脑缺血发生时会出现局部血液循环障碍，最终导致细胞坏死和细胞凋亡。
花色苷是由花色素和糖苷的组合形成的天然黄酮类化合物。
2. 文献综述
花色苷治疗缺血性脑卒中的研究综述【摘要】随着全球老龄化的加剧，脑血管疾病的发生率逐年上升，其中缺血性脑卒中最为常见。
当脑缺血发生时会出现局部血液循环障碍，脑组织在缺血、缺氧情况下发生无氧酵解，产生大量乳酸等代谢产物，引发细胞肿胀，最终导致细胞坏死和细胞凋亡。
花色苷是由花青素和糖苷的组合形成的天然黄酮类化合物。
3. 设计方案和技术路线
1、实验体系的构建（1）SH-SY5Y细胞的培养、传代和保藏（2）SH-SY5Y细胞的诱导分化（3）SH-SY5Y细胞 OGD模型的构建与评价（4）黑枸杞花色苷给药浓度和给药时间的考察2、黑枸杞花色苷对SH-SY5Y细胞OGD模型细胞凋亡的改善作用（1）细胞活力检测：CCK-8法（酶标仪）（2）细胞凋亡检测：Hoechst 33258染色法（倒置荧光显微镜），Annexin V-FITC/PI双染法（流式细胞仪）3、黑枸杞花色苷对SH-SY5Y细胞OGD模型细胞凋亡改善作用的机制研究（1）线粒体凋亡信号通路中关键蛋白表达水平检测：qPCR法、Western blot法
4. 工作计划
2022年1月至2月：文献调研，熟悉课题研究背景，撰写文献综述2022年3月：SH-SY5Y细胞的培养、诱导分化和制备糖氧剥夺模型2022年4月：黑枸杞花色苷给药浓度和给药时间的筛选，细胞活力与细胞凋亡检测2022年5月：细胞凋改善作用的机制研究
5. 难点与创新点
在前期工作中本课题组采用具有自主知识产权的组合柱色谱技术从黑枸杞果实中纯化和鉴别了2种单体成分，并率先报道了上述花色苷单体成分对于缺血性脑卒中损伤具有显著的保护作用。
本毕业设计是在前期工作上进一步从抵抗细胞凋亡的角度考察黑枸杞花色苷对缺血性脑卒中保护作用的分子机制，研究内容尚未见于文献报道，具有一定的创新性。
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